Заключение по результатам генно клеточной терапии

Сравнение эффективности клеточной, генной и генно клеточной терапии по критерию сохранности миелиновых волокон при травме спинного мозга крысы (Рис. 98) позволяет заключить, что

• нативные ККП при их трансплантации в зону повреждения в большей степени способствуют сохранности миелиновых волокон, чем КОВ. На расстоянии 3 мм от эпицентра травмы количество миелиновых волокон в опыте с ККП больше в среднем в 1,5 раза, а на расстоянии 5 мм - в 2 раза, чем в опыте с КОВ;
• прямая генная терапия относительно менее эффективна, чем клеточная;
• генно-модифицированные ККП производят более выраженный эффект, чем нативные;
• количественный результат комбинированной генно-клеточной терапии по данному критерию в пределах точности эксперимента проявляется как простая сумма показателей, соответствующих применению только клеточной или только прямой генной терапии. Подобная аддитивность не позволяет говорить о взаимном усилении действия клеток и генов при их объединении в общую генно-клеточную конструкцию и свидетельствует о том, что поддержка ремиелинизации обусловлена одновременной и независимой экспрессией во внешнюю среду нейротрофических факторов собственным генным аппаратом трансплантируемх клеток и внедренной в них плазмидной или вирусной конструкцией.

В то же время, по площади сохранного вещества аддитивности не наблюдается (Рис. 94). Прямая генная терапия посредством голой плазмиды или рекомбинантного аденовируса более эффективна, чем просто клеточная, а включение плазмиды или аденовируса в состав клеточного носителя не дает выигрыша или даже ухудшает результат.

Рис. 94. Площадь сохранного вещества (мм) на расстоянии 5 мм от эпицентра травмы в каудальном направлении (по оси ординат). По оси абсцисс - экспериментальные группы. * - р<0,05; ** - р<0,005

Аналогичная ситуация имеет место и в отношении суммарной площади мелких патологических полостей в белом веществе. По-видимому, здесь важен не столько уровень нейротрофических и ангиогенных факторов в межклеточной среде, сколько выработка этих факторов в самих клетках-мишенях, чему способствует встраивание в них плазмидной ДНК. Возможно, наличие промежуточного носителя в генно-клеточных конструкциях препятствует такому встраиванию. Другая причина может состоять в существенно большем количестве плазмидных молекул, вводимых при прямой генной терапии, чем при клеточно-опосредованной.

Тем не менее, по совокупности результатов комбинированная генноклеточная терапия имеет преимущество перед чисто клеточной или прямой генной терапией. Если сравнивать между собой различные генно-клеточные конструкции из числа исследованных нами, то трансдукция ККП аденовирусным вектором gdnf выглядит оптимальной. По нашим данным, клеточно-опосредованная доставка терапевтического гена gdnf при помощи аденовирусного вектора в область травмы спинного мозга позволяет наиболее эффективно стимулировать его посттравматическую регенерацию, что проявляется в виде улучшения показателей восстановления двигательной функции, степени кавитации, сохранности ткани и миелиновых волокон, увеличения количества реактивных астроцитов, а также олигодендроцитов, существенно необходимых для протекания процесса нейрорегенерации.

Таким образом, результаты настоящего исследования показывают, что при травме спинного мозга терапевтический эффект немедленной трансплантации стволовых клеток, генетически модифицированных при помощи плазмидных и вирусных векторов c клонированными генами ангиогенных и нейротрофических факторов, более выражен, чем при трансплантации тех же нативных клеток.

В то же время клеточно-опосредованная и прямая инъекция генов проявляют специфические различия своего действия, обусловленные преимущественно паракринным и аутокринным влиянием, соответственно. Сравнительная оценка эффективности применения плазмиды pBud-VEGF- FGF2 при доставке с помощью ККП и при прямой инъекции плазмидной ДНК в область КТСМ по критериям площадь патологических полостей и количество миелиновых волокон, выявила большую степень нейрорегенерации в условиях проведения генно-клеточной терапии. Доставка генов vegf и fgf2 при помощи ККП человека в большей степени поддерживает миграционный потенциал и стимулирует дифференцировку заселяющих область повреждения эндогенных шванновских клеток.

Более высокие показатели по таким критериям, как сохранность ткани, степень неоваскуляризации и восстановление двигательной активности в экспериментах с непосредственным введением плазмиды pBud-VEGF-FGF2 дают основание полагать, что исследования в этом направлении также имеют определенную перспективу. Регенераторный потенциал плазмидной ДНК может быть дополнительно усилен введением в ее состав участков, способных специфично связываться с мембранными рецепторами, для увеличения эффективности проникновения плазмиды в клетки спинного мозга.

Назад | Оглавление | Вперед

Дата публикации (обновления): 16 февраля 2017 г. 15:29

.

	Жизнь после травмы спинного мозга