2.4. Оценка восстановления функции спинного мозга

До проведения эксперимента проводили тренировку крыс для адаптации в обстановке в течение 5 дней 2 раза в день. Несколько крыс одновременно помещали в открытое поле и подталкивали к движению. Каждая крыса выдерживается в открытом поле 30-60 минут или до появления признаков беспокойства. Начиная с 7-х суток после КТСМ во всех экспериментах, животных тестировали в открытом поле через сутки по методу (Basso et al. 1995) (тест «ВВВ»). Для тестирования животных были привлечены два независимых исследователя.

Разделяют три фазы процесса восстановления произвольных движений после травмы спинного мозга: ранняя, промежуточная и поздняя. Начало ранней фазы характеризуется параличем задних конечностей, крысы передвигаются вперед с помощью передних конечностей. К окончанию ранней фазы наблюдаются одновременные экстенсивные движения в тазобедренном и, коленном и голеностопном суставах. Восемь категорий (от 0 до 7 баллов) по шкале «ВВВ» включают все комбинации слабых или экстенсивных движений.

В течение промежуточной фазы крысы начинают располагать стопы плантарной поверхностью к грунту, оценивают положение стопы, шагание и координацию передних и задних конечностей. В зависимости от характеристики этих критериев животные получают оценку от 8 до 13 баллов (Basso et al. 1995).

Поздняя фаза восстановления включает категории от 14 до 21 балла и предусматривает оценку таких признаков как пальцевый клиренс, преимущественное положение стопы, стабильность туловища и положение хвоста. Эти признаки начинают оценивать только после того, как крыса начинает демонстрировать постоянные координационные плантарные шаги. Преимущественное положение стопы оценивается при опоре конечности на грунт. В норме стопа ставится параллельно туловищу и в момент начала контакта с грунтом, и в момент отрыва. При КТСМ обычно имеет место ее ротация наружу или внутрь (Basso D.M. et al. 1995).

2.5. Световая микроскопия

Просмотр препаратов и оцифровку изображений для морфометрии проводили на микроскопе Axio Imager A1 (Carl Zeiss). Флюоресцентцию анализировали с помощью флюоресцентного микроскопа «Axioskop 40».

2.6. Программное обеспечение и статистическая обработка результатов

Измерение площади полостей на цифровых изображениях проводили с помощью программы Image Tools. Результаты морфометрии обрабатывали с использованием t-критерия Стьюдента, ANOVA, программа OriginPro.

Назад | Оглавление | Вперед

Дата публикации (обновления): 12 февраля 2017 г. 20:20

.

	Жизнь после травмы спинного мозга